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液相色譜知識

色譜定量方法對比

2024-01-03 Vink

色譜定量方法主要有以下三種:


1. 歸一化法:把所有出峰的組分含量之和按100%計的定量方法。各成分校正因子一致時可用該法,該法簡便、準確,特別是進樣量不容易準確控制時,進樣濃度及進樣量的變化的影響很小。其他操作條件,如流速、柱溫等變化對定量結(jié)果的影響也很小。

2. 外標法(標準曲線法、直接比較法):首先用欲測組分的標準樣品繪制標準工作曲線。具體作法是:用標準樣品配制成不同濃度的標準系列,在與欲測組分相同的色譜條件下,等體積準確量進樣,測量各峰的峰面積或峰高,用峰面積或峰高對樣品濃度繪制標準工作曲線,此標準工作曲線應(yīng)是通過原點的直線。若標準工作曲線不通過原點,說明測定方法存在系統(tǒng)誤差。標準工作曲線的斜率即為絕對校正因子。當欲測組分含量變化不大,并已知這一組分的大概含量時,也可以不必繪制標準工作曲線,而用單點校正法,即直接比較法定量。

3. 內(nèi)標法:選擇適宜的物質(zhì)作為欲測組分的參比物,定量加到樣品中去,依據(jù)欲測組分和參比物在檢測器上的響應(yīng)值(峰面積或峰高)之比和參比物加入的量進行定量分析的方法稱為內(nèi)標法。內(nèi)標法的關(guān)鍵是選擇合適的內(nèi)標物。


以上三種色譜定量方法各有其特點和使用范圍,應(yīng)根據(jù)具體實驗條件和需求選擇合適的方法。